花烛属亲缘关系分析与细菌性枯萎病的检测
【摘要】：花烛属植物(Anthurium)是天南星科重要的观赏植物,品种的鉴别、亲本的选择、优良杂交组合选配对于花烛属植物新品种的选育起着至关重要的作用。本研究从田间形态学和SRAP分子标记技术两个方面对花烛属88个品种进行了亲缘关系的分析,并筛选出2对多态性较高的SRAP引物,构建现有花烛属88个品种的指纹图谱。另外,根据基因库中已发表的花烛属细菌性枯萎病致病菌粉黛单黄胞杆菌基因序列设计引物,通过对扩增条件进行优化,建立了花烛属细菌性枯萎病的Nested-PCR检测方法,利用该方法对组培苗和成品植株进行检测,对于今后筛选亲本、进行抗病性育种的工作具有深远意义。主要结果如下: 1.对花烛属88个品种的54个形态学性状进行鉴定和分析,其平均变异系数0.36,佛焰苞复色方式的变异系数最高,为1.50,花瓣异化的变异系数最小,为0.05。基于形态数据的聚类分析,花烛属88个品种被分为7大类群。 2.利用21对SRAP引物对花烛属88个品种进行扩增,共扩增293条多态性条带,平均多态带百分率为99%,平均多态性条带为13.95。 3.本研究选择2对扩增谱带稳定性好、分辨率高的引物,把88个品种区别开来,构建了供试花烛属88个品种SRAP指纹图谱。2对引物共获得31个等位位点,记录了2728个条带。 4.基于SRAP分析的聚类结果显示,本试验供试花烛属品种遗传距离为0.08-0.82,各供试材料在聚类分析图中的位置与佛焰苞颜色、佛焰苞大小和植株高度相关,88份材料被分为3个类群,同一公司培育的品种基本上聚在一类。 5.试验所用Nested-PCR方法可以直接从感染细菌性枯萎病的花烛属组织DNA中扩增出1条343 bp的特异性条带,该条带与GenBank登录的Xanthomonas.campestris pv.dieffenbachiae序列X70380.1同源性在99%以上。在整个植株中都检测到了X.campestris pv.dieffenbachiae的特异性条带,其中老叶的叶柄DNA扩增强度最高,根茎连接处、老叶、嫩叶柄、嫩叶、佛焰苞柄扩增强度次之,在根、佛焰苞和花序中扩增最弱。